操作步骤:  
1）活化素Aelisa试剂盒使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。  
2）根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。  
3）加取释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37÷育1小时。  
4）甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。  
5）每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37÷育30分钟。  
6）甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。  
7）每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37÷育10分钟。避免光照。  
8）取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立尖定结果。  
9）在450nm波长处测定各孔的OD值。  
试剂和样本的控制方法：  
一、试剂  
1.试剂的选择：**明确要求要采用批批检定的形式对ELISA试剂严格把关，我司严格按照**标准进行生产，已获得**承认的“三证”，每一个产品都有对应的生产批号，只要客户提前下单，我们就能为您提供新批次的产品，不必担心会有过期的试剂。我司的试剂，值得您选择。  
2.试剂的准备：先将试剂盒先从冰箱中拿出来，在室温下放置20-30min后，再进行测定，使试剂盒在使用前与室温平衡，这样做的目的能使反应微孔内的温度较快地达到所需的温度，以后面的测定需求。  
二、样本  
1.内源性干扰因素：包括类风湿因子、补体、高浓度的非特异免疫球蛋白、异嗜性抗体、某些自身抗体等；  
类风湿因子的控制方法：  
①用F(ab)2替代完整的IgG；  
②标本用联有热变性IgG的固相吸附剂处理；  
③检测抗原时，可用加入到标本稀释液中使RF降解；  
补体的控制方法：  
①用EDTA稀释标本；  
②56℃30min加热血清使C1q灭活；  
2.外源性干扰因素：包括标本溶血、细菌污染、保存时间过长或凝固不全等；  
控制方法：采血时规范操作，采集的血液勿用力震荡，以防溶血；收集标本时采用无菌试管，经检测后再低温冻存；保存时间不宜过久，检测时尽量采用新鲜标本；对于凝固不全的血标本可适当加入抗凝剂，并放入37℃水中1h，待充分凝固后再离心分离血清。  
具有如下优点：  
一、、灵敏、特异的抗体；  
二、稳定的重复性和可靠性；  
三、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相载体；  
四、适营清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型；  
五、性价比非常好，节省实验经费。  
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