血液中金和银纳米粒子的检测
http://www.testrust.com 检测通 时间：2015-10-12
【摘要】
小尺寸的纳米粒子由于其单位体积里具有更大的表面积而意味着具有增强的反应性。在这种属性可以加强预期效果的同时， 也有引入新的、 未知的有害的影响的可能性。两种金属纳米粒子--金和银粒子，金粒子由于其具有高化学稳定性、 易于控制颗粒大小和实现表面功能化被广泛应用于研究，银粒子具有抗菌效果经常被用于伤口灭菌、医学部件和假体涂层， 以及商品化的纺织品、化妆品和日用商品。
方案优势
SP-ICP-MS具有快速准确的检测和分析血样中金、银纳米粒子，适用于低粒子浓度和多种粒子混合物。这一方法只需要简单的样品制备方法(只需稀释)，采用PerkinElmer的NexION 350 ICP-MS和SyngistixNano Application 软件模块，为科研应用提供持续的数据采集、瞬时粒子计数和粒子大小测定。
采用标准
相关标准
方法/原理/步骤
样品和样品前处理
血液标准物质(Seronorm™Trace Elements in Whole Blood,Level I)，采用四甲基氢氧化铵(TMAN) +0.1%Triton-X稀释20倍后待测。金和银纳米粒子(金颗粒-30nm和/或60nm，NIST®8012\8013;银颗粒-40和/或60nm,TedPella™Inc.)按不同浓度加入到血样中。为了打碎结块的粒子，储备液需要超声5min后再加入到血样中。制备好的血样摇匀后测定。
结果分析
初步实验采用金纳米粒子。图1为加入30nm和60nm金NPs(每种约100,000个粒子/mL)的血样，如图所示，可以清晰的区分两种粒子的粒径分布，表明这两种大小的金纳米粒子可以被分析检测。样品连续测定3次，测定的粒子大小结果。见表1
|
eplicate |
Nominal Size (nm) |
Most Frequent Size (nm) |
Mean Size (nm) |
Particle Concentration (Particles/mL) |
|
1 |
30 |
30 |
31 |
108,710 |
|
60 |
61 |
62 |
107,490 |
|
|
2 |
30 |
31 |
31 |
102,878 |
|
60 |
61 |
62 |
101,294 |
|
|
3 |
30 |
30 |
32 |
102,017 |
|
60 |
60 |
62 |
103,467 |
表明方法的准确性和重复性。
接下来，将40nm和60nm的银NPs加入到血样中，使每毫升样品中总粒子浓度约为200,000个。图2显示出检测得到的粒子分布，表4为连续测定3次的分析结果。样品中40nm粒子数量比60nm粒子多，除此之外，测定结果对两种粒子均具有好的准确性和重复性。
表2.连续测定3次的分析结果
|
Replicate |
Nominal Size (nm) |
Most Frequent Size (nm) |
Mean Size (nm) |
Particle Concentration (Particles/mL) |
|
1 |
40 |
41 |
42 |
100,024 |
|
|
60 |
60 |
63 |
97,483 |
|
2 |
40 |
41 |
42 |
101,967 |
|
|
60 |
61 |
63 |
98,957 |
|
3 |
40 |
41 |
42 |
102,263 |
|
|
60 |
60 |
63 |
99,069 |
为考察血样中低粒子浓度也可以被检测，将40nm银NPs加入到血样中，使每毫升样品中约含有50,000个粒子，是前面实验浓度的一半。图3为粒子分析结果，同时，表5中数据表明，即使是低浓度的银NPs采用本文方法检测也可以得到好的准确性和重复性。
表3.连续测定3次数据结果重复性良好
|
Replicate |
Nominal Size (nm) |
Most Frequent Size (nm) |
Mean Size (nm) |
Particle Concentration (Particles/mL) |
|
1 |
40 |
42 |
43 |
50,242 |
|
2 |
40 |
42 |
43 |
50,775 |
|
3 |
40 |
42 |
42 |
50,486 |
仪器设备
仪器介绍以及仪器设置条件
样品使用PerkinElmer公司的NexION®350D ICP-MS，配有Nano Application Module软件模块。仪器条件如下表1，采用溶解和悬浮金或银建立标准曲线，表2为建立标准曲线的标准信息。两部淋洗，样品间采用1% HCl + 0.1%Triton-X淋洗两次去除残留的金粒子，之后用去离子水入去除残留HCl。采用1% HNO3 + 0.1%Triton-X作为银粒子冲洗液。这两步淋洗方法是必要步骤，这是由于残留酸可以溶解样品中的粒子。每步淋洗需1min。
中质（北京）建设工程检测鉴定中心（代号为CZZX）是依法设立的第三方检测/检查机构，2
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深圳市索奥检测技术有限公司（SOAO Analysis Labortory)，简称SAL，是一家具有独立法
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