方案优势

相比于其他方法，本方法简单快速，分离效果好，且无需对脂肪酸样品进行衍生化，为UPC2 技术在油脂相关分析领域的进一步应用和研究提供了参考。

采用标准

植物油脂中的棕榈酸(C16∶0) 、硬脂酸(C18∶0) 、油酸 (C18∶1) 、亚油酸(C18∶2) 和亚麻酸(C18∶3)5种脂肪酸的含量变化会直接影响到油脂的性质和质量，所以建立一种快速、准确地检测上述5种脂肪酸含量的方法很有必要。

方法/原理/步骤

　　1.混合标准溶液的配制

　　准确称取棕榈酸、硬脂酸、油酸、亚油酸和亚麻酸等5种脂肪酸标准品，分别用正己烷配制质量浓度均为1g/L的各脂肪酸标准品储备液。其他浓度的工作溶液以此储备液用正己烷稀释而成。

　　2.样品制备

　　称取约2g大豆油置于50mL烧瓶中，加入4g20%的KOH溶液，加冷凝管于100℃油浴中回流反应8 h，停止加热。待反应液冷却后，加入4mL 2mol/L的H₂SO₄溶液进行酸化，卸下烧瓶，转入分液漏斗，静置分层，上层用水洗涤至中性，加入无水Na₂SO₄进行干燥，即得脂肪酸样品。称取约0.01g该脂肪酸样品于100mL容量瓶中，用正己烷定容，溶液经有机膜过滤后直接进UPC2系统分析。

　　3.UPC2色谱条件:

    采用ACQUITY UPC2 BEH2-EP色谱；系统背压为2000 psi；色谱柱温度为50℃；样品室温度为10℃;；流动相分别为超临界CO₂(流动相A)和甲醇-乙腈(体积比1∶1，流动相B)；进样量为1μL；柱流速为1.0 mL /min;流动相梯度洗脱程序∶0～2min，98%～96%A；2～3min，96%A；3～4min，96%～90%A；4～5min，90%～98%A。

　　4.MS条件：

　　离子源为ESI-；毛细管电压为2.0 kV；锥孔电压为40V；源温度为150℃；脱溶剂气温度为500℃；脱溶剂气体流速为850L/h；锥孔气体流速为40L/h；SIR离子为m/z 255.42，283. 48，281. 46，279. 45，277. 43。

仪器设备

ACQUITY UPC² 系统

科研人员们可以用它来分离、分析和弄清那些LC和GC技术无法处理的物质，包括:疏水性和手性化合物；脂质；热不稳定样品；聚合物

由于其具有溶剂载量少、分离度高、峰形窄、分离速度快等特点，因此也可以作为MS的完美结合。

系统特征:

1.主要的流动相为压缩二氧化碳（CO₂），与液体流动相或载气相比，降低了成本和毒性。

2.0.5μL至10μL的灵活可变进样体积，以及色谱柱与进样量相匹配的功能，可以最大程度减少样品损失，以及更换进样环的需要。

3.色谱柱快速再平衡和更短的运行时间，使您每天可以处理更多的样品。

4.共同溶剂和色谱柱转换功能，可以快速地筛选溶剂和色谱柱，提高了方法开发的灵活性。

Waters 2695-SQD

技术指标与参数：

四元梯度输液泵，溶剂数：四元，光电二极管阵列检测器 波长：190-800nm

功能与使用范围：

药品安全型评价研究、药代、毒代动力学研究。