方案优势

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采用标准

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方法/原理/步骤

　　icroCal Auto-iTC200采用等温滴定量热法测量各种分子相互作用中所涉及的结合亲和力和热力学参数。

　　等温滴定量热法(ITC)的原理

　　等温滴定量热仪测量两个分子相互作用时产生的热量变化。当相互作用的分子由自由状态转入束缚状态时，非共价键重新分配和形成，从而导致吸热或放热。ITC通过测量结合配偶体混合时作用于池加热器以保持参比池和样品池零温差所需的差分电功率来监测这些热量变化。

　　Prod-autoITC200-1

　　ITC系统主要部件示意图。

　　参比池通常注入水。样品池包括一个结合配偶体和一个盛装配体的搅拌注射器。配体以小等分试样注入样品池中，直到配体浓度比样品浓度高出2至3倍为止。每次注入配体都会形成一个热脉冲,该脉冲与时间积分，并进行浓度归一化，以生成kcal/mol对摩尔比(配体/样品)的滴定曲线。得出的等温线配合结合模型，以生成亲和力(KD)、化学计量(n)和相互作用的焓(ΔH)。

仪器设备

　　MicroCal iTC200设计特点是易于使用和极其灵敏。其亲和范围大，让亲和力从弱到强的亲和体分析极具重现性。自动清洗和注射器加载功能最大限度减少了操作人员的参与，同时用户友好的软件会引导所有操作实现快速、准确的分析。

　　系统直接测量生物化学结合过程中释放或吸收的热量，然后计算出结合亲和力(KD)、化学计量(n)、焓(ΔH)和熵(ΔS)。样品制备和系统优化工作量最少，数据生成快速、方便。

　　通过MicroCal iTC200可以研究大量的应用，包括表征小分子、蛋白质、抗体、核酸、脂类和其他生物分子的分子间相互作用。它也可用于测量酶动力学。

　　所有结合参数(亲和力、化学计量、焓和熵)只需一次实验。

　　无需分析开发过程即可快速获得初步结果，无标签、无固定化且无分子量限制。

　　仅用10µg蛋白质就可灵敏地研究任何生物分子的相互作用。

　　直接测量毫摩到纳摩级亲和力(KD­S)(10~­2至10-9 M)。

　　利用极具竞争力的结合技术测量纳摩到皮摩级分解常数(10-9至10-12M)。

　　实验设计向导和自动数据分析功能支持快速可靠的分析。

　　硬币形池优化了样品混合。

　　池容量小—样品消耗更少。

　　非反应性镍基合金具有耐化学性，与各种生物样品相容。

　　半自动装填、进样和池清洗。

　　与非水溶剂相容。

　　用户友好的软件实现快速准确的分析。

　　可升级至全自动的MicroCal Auto-iTC200。