高效测量多个生物分子结合参数
http://www.testrust.com 检测通 时间:2014-12-09
【摘要】
马尔文 MicroCal Auto-iTC200 是一款全自动低容量高灵敏度的等温滴定量热仪。 可在一次实验中对所有结合参数进行直接、无标记的溶液内测量。。 其应用包括表征小分子、蛋白质、抗体、核酸、脂类和其它生物分子的分子间相互作用。 它也可用于进行酶动力学测量。
方案优势
MicroCal Auto-iTC200集MicroCal iTC200的高灵敏度—量热仪的核心—和唾手可得的自动化于一身,以满足繁忙的研究和药物发现实验室的生产力需求。 系统直接测量生物化学结合过程中释放或吸收的热量,然后计算出结合亲和力(KD)、化学计量(n)、焓(ΔH)和熵(ΔS)。 无需将样品和试剂制备到适宜的浓度,分析开发过程最少,最快得到初步结果。 易用的软件包括优化后的自动化脚本,各种样品类型和条件都能够稳健地运行。 用户友好的设计向导可协助选择实验运行参数。 专业工具可自动处理数据,实现快速可靠的分析。
采用标准
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方法/原理/步骤
马尔文MicroCal Auto-iTC200利用等温滴定量热法的技术来测量各种分子相互作用中所涉及到的结合亲和力和热力学参数。
等温滴定量热法(ITC)的原理
等温滴定量热仪测量两个分子相互作用时发生的热量变化。当相互作用的分子由自由状态转入束缚状态时非共价键重新分配和形成,从而导致吸热或放热。ITC通过测量结合配偶体被混合时作用于池加热器、保持参比池和样品池零温差所需的差分电力来监测这些热量变化。
Prod-autoITC200-1
ITC系统主要部件示意图。
参比池通常注入水。样品池包括一个结合配偶体和一个盛装配体的搅拌注射器。配体按小等分试样注入样品池中,直到配体浓度比样品浓度高出2至3倍为止。每次注入配体都会形成一个热脉冲与时间结合,并进行浓度归一化,以生成kcal/mol对摩尔比(配体/样品)的滴定曲线。得出的等温线配合结合模型,以生成亲和力(KD)、化学计量(n)和相互作用的焓(ΔH)。
仪器设备
所有结合参数(亲和力、化学计量、焓和熵)只需一次实验。
以最少的分析开发过程快速获得初步结果,无标签、无固定化且无分子量限制。
出色的数据质量,可精确到亚毫摩尔到皮摩尔分解常数(10-2至10-12 M)。
硬币形池优化了样品混合。
非反应性镍基合金具有耐化学性,与各种生物样品相容。
仅用10µg蛋白质就可以灵敏地研究任何生物分子的相互作用。
用户友好的实验设计向导和自动数据分析功能支持快速可靠的分析。
样品呈现在带温控的96-孔板上。
全自动系统配备离开操作功能,提高了生产率。
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