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马尔文升入研究分子中的相互作用

http://www.testrust.com 检测通 时间:2014-11-27

【摘要】

MicroCal VP-ITC 是一种强大而灵敏的、易于使用的等温滴定量热仪,能用于研究任何生物分子相互作用。 其快速、方便、无标记和溶液内技术可提供表征蛋白质、抗体、核酸和其他生物分子的分子相互作用所需的信息。 系统广泛用于研究环境以进行先导化合物优化、靶标发现苗头化合物验证、结合驱动机制评估和酶动力学研究以及抑制剂设计。

方案优势

icroCal VP-ITC可提供亲和力数据,从而深入了解生物分子相互作用,并可用于研究任何此类的相互作用。 等温滴定量热法无需使用标记,并且采用溶液内分析,快速方便,可选择多种缓冲液,没有分子量方面的限制。 MicroCal VP-ITC 是一套完整的系统,无需额外的附件、试剂或耗材。 样品一旦加载,系统便开始无人值守运行,让用户有时间做其它工作。

采用标准

测量类型:亲和力(KD)测量类型:焓∆H测量类型:熵 ∆S测量类型:化学计量(n)样品量:2mL样品池容积:1400µLInjection syringe volume:300µLSample capacity:4-8 / 8h 天Cell material:镍基合金样品池:硬币形Noise:0.2 ncal/s温度范围:2℃ ~80℃Response time:20s(高反馈)Multiple feedback modes:是(被动, 高增益,低增益)电源功率:100-240V,50/60Hz,120W重量: 11.5 kg(量热计) 9 kg(控制器) 尺寸 (宽, 长, 高):: 200mm x 370mm x 440mm(量热计) 150mm x 410mm x 360mm(控制器) 运行环境 Temperature (operating):10℃ ~28℃湿度::0% ~70% 相对湿度,无冷凝

方法/原理/步骤

  MicroCal VP-ITC利用等温滴定量热法来测量各种分子相互作用中所涉及到的结合亲和力和热力学参数。

  等温滴定量热法(ITC)的原理

  等温滴定量热仪测量两个分子相互作用时发生的热量变化。当相互作用的分子由自由状态转入束缚状态时,非共价键重新分配和形成,从而导致吸热或放热。ITC通过测量结合配偶体混合时作用于池加热器、以保持参比池和样品池零温差所需的差分电功率来监测这些热量变化。

  Prod-autoITC200-1

  ITC系统重要部件示意图

  参比池通常注入水。样品池包括一个结合配偶体和一个盛装配体的搅拌注射器。配体以小等分试样注入样品池中,直到配体浓度比样品浓度高出2至3倍为止。每次注入配体都会形成一个热脉冲,该脉冲与时间积分,并进行浓度归一化,以生成kcal/mol对摩尔比(配体/样品)的滴定曲线。得到的等温线配以结合模型可生成亲和力(KD)、化学计量(n)和相系作用的焓(ΔH)。

仪器设备

  等温滴定量热法(ITC)测量任何两个分子间的结合亲和力和热力学参数。物质结合时,或者放热,或者吸热。在ITC实验中测量该热量变化可精确地测定结合常数(KD)、相互作用化学计量(n)、焓(ΔH)和熵(ΔS),从而在一次实验中提供齐全的分子相互作用热力学信息。

  MicroCal VP-ITC也可通过在各种温度下进行实验来测定结合后的热容变化。

  直接测量毫摩到纳摩级亲和力(KD­S)(10~­2至10-9 M)。

  利用极具竞争力的结合技术测量纳摩到皮摩级分解常数(109至1012M)。

  非反应性镍基合金具有耐化学性,适应各种生物样品。

  池固定在原位,仅需少量维护,具有可再生和超灵敏的性能。

  精确液体传递系统保证进样准确、可重现。

  硬币形池优化了样品混合。

  三个用户可选的响应时间使应用多样化。

  用户可选择混合速度以配合样品条件。

  帕帖尔控制实现快速温度平衡。

  包括ThermoVac™样品制备和清洗装置。

  由VPViewer™软件控制,由Origin™执行数据分析。

  真正的溶液内技术:无需标签或固定化。无缓冲液限制。轻松处理浑浊溶液。

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