方案优势

1. 电泳的buffer和gel都是新制的，暗箱式紫外分析仪切胶的台子清理干净，刀片最好洗净灭菌，总之一句话就是保证切下的带没有外源dna污染。 2. 切胶是要把整个目的片断所在位置的胶全部回收。为了减少胶的体积，可以用相对比较薄的胶来做，只要够点样即可，也可采用薄而宽的梳子来跑胶。 3. 关于防护，在一般有机玻璃后就足够了，戴上防护面具以保护眼睛，如果戴树脂眼镜就可以了。要是非常害怕紫外照射，或者对于胶有特殊要求，例如要求不含EB，可以采用点marker和带刻度的尺子一起照相的方法来确定目的条带在胶上的位置进行切胶。 4. 按照正常程序点marker跑胶，然后切下有marker的胶，EB染色，紫外灯下与带刻度的尺子一起照相。由于要回收的带与marker间的相对位置已知，根据尺子来衡量未染色胶上目的带的位置即可。如果觉得很难判断，可以直接在marker边点少量的样，这样位置就容易确定了。

采用标准

国标

方法/原理/步骤

　　注意开机顺序，先开凝胶成像系统，再打开电脑进入软件。

　　紫外凝胶照相时要防止EB污染仪器，凝胶成像系统的门不能用污染的手套接触，进行软件操作时同样不能被污染的手套接触。

　　在使用紫外光源照相的过程中，不可以打开凝胶成像系统前面板。

　　照相后经废胶取出，并用较软的纸擦拭干净。

　　调焦时要轻，动作不要剧烈。

　　环境电压不稳定时，请使用稳压电源。使用过程中如遇断电，请及时将仪器电源关闭，直至重新来电。

　　使用时，请先打开仪器的电源开关，再打开电脑开关并打开软件(Quantity One)。

　　保持观测室内环境干燥，及时将遗留在观测板上的水或其他液体檫干(可使用软质纸，一般卷纸即可)。

　　观测用EB(溴乙锭)染色的凝胶时，注意不要污染仪器表面。千万不要用手光纤冷光源直接接触凝胶，或戴着接触过凝胶的手套去接触仪器的门和观测台的把手。

　　使用仪器时，要将门及观测台关紧，否则将无法正常使用紫外灯。

　　尽可能不要将电脑连接到因特网或局域网上，同时在电脑上安装杀毒软件(推荐使用正版软件)，做到专机专用。

　　较长时间不用仪器时，请将仪器用防尘罩盖上。

　　为延长灯管的使用寿命，请观测好凝胶后及时关闭光源(仪器自身有15分钟的自动保护程序)。

仪器设备

　　系统配置及主要技术参数：

　　▲紫外/白光灯箱：全密闭灯箱，有效保护相机，

　　透射波长：312nm，

　　紫外透射面积：200×200mm，

　　8根灯管，保证强度，照射均匀，紫外光强弱可调

　　可作琼脂糖电泳显微照片，酶标板，放射自显影照片，Slot/杂交分析等。

　　配有白光转换板，使紫外与白光转换方便快捷。

　　数码相机：

　　1010万象素，分辨率：3072×2304像素；

　　像素密度：8位(256级灰度)；

　　像素大小：4.7×6.1µm；

　　数码变焦：约4.1倍；

　　检测信噪比：≥66 dB；

　　检测灵敏度：＞1pgEB染色的双链DNA

　　连续曝光时间：0.0005～900s；

　　微距自动调焦：5-50mm微距调焦

　　▲白光板：透射面积250×230mm，可作Protein胶，蛋白电泳

　　▲滤光镜头：德国进口琥珀色Eb.专用滤光镜片，含转换接口

　　▲程控拍摄软件：全程通过电脑控制数码相机的光圈、快门速度、变焦、文件存贮、转换等各项参数。对数码相机的全部操作过程在计算机上实现。

　　▲定量分析软件：进口分析软件AABI，可做1D(单向电泳)已汉化、2D(双向电泳)及RLFP(聚类分析)带汉化版

　　▲高配置品牌电脑及打印机。

　　YLN-2000凝胶影像分析软件说明

　　适于：凝胶电泳图谱、薄层电泳图谱，图像格式支持TIF、PCX、BMP和JPG等影像分析图像获取方式 能够轻易地从多种设备上获取图像,如CCD摄像机、数字化CCD、CooledCCD、扫描仪等全面支持多种文件格式与输入设备支持24位彩色,8位、12位、16位精确灰度，32位浮点图像。

　　灰度光密度校正. 建立背景扣除模式;自动或人工设定光密度校正功能

　　图像处理 对待测图像进行加强效果色彩、亮度、对比度。

　　自动生成用户程序 用户可记录每个操作步骤并生成处理程序,以后只要一次轻击鼠标即可完成当前工作。

　　泳道分析 自动识别多条泳道和条带，自动描绘扫描曲线，可修正条带和前部扭曲等功能。分子量计算 选择标准的泳道的分子量值，计算出其他泳道的分子量。

　　Dot Blot分析 对圆形，矩形(Slot Blots)Dots,算出每一个dot的密度值并作出统计图形等功能。

　　Colony计数 自动/手动找出Spot，多种测量参数选择，并可将统计数据根据用户标准自动分类。

　　面积密度 可自定义计算某一区域的面积，密度值，平均密度值等参数。

　　方便交流 所有的分析计算的结果均可动态连接到Microsoft Excel电子表格软件作进一步的分析处理

　　自定义报告格式 系统提供报告生成器，生成专业公文和研究报告，可以帮助您创作用户化的图像报告并交付打印输出

　　1D主导程序(一维凝胶电泳)

　　预处理：解析钝化和增强弱带

　　1D、PCR、TCL分析简易参照泳带

　　试验泳带，图形，用户自编文件报告和菜单

　　单泳带或多泳带定量报告和注释

　　凝胶上所有泳带的报告

　　用户自定义报告定量、辨别、命名及14项功能任意选择

　　2D(二维)凝胶的定量辨别

　　沿着或围绕PCR泳带扫描

　　影像定量：椭圆形、圆形、矩形及随意形状定量

　　2D主导程序(二维凝胶电泳)

　　2D：定量和识别(分子量和等电点)，所有或部分

　　2D、PCR、原位杂交、DNA多影像的比较

　　全部或部分斑点的比较和对比表试验：参比(T/R)及%变化(T-R/R)

　　1D增强程序增补

　　任意两条泳带的定量和比较，样品/参照/比率和每条泳带T-R/R变化比

　　1D与其它的对比，图形叠加，识别图形和对比表

　　多图形的排列，图形和列表对比，%均化

　　所有样品的平均图形

　　图形识别：试验样品与对照品的图形识别

　　动态视觉与定量比较，将一泳带与旁边的泳带叠加并储存加以分析

　　基因表达和2D动态对比，叠加全部或部分2D、排列和储存用于定量对比

　　2D增强程序增补

　　影像图的图形比较柱状图：红色(样品)，绿色(参照物)…两者相等

　　扣除图

　　凝胶的规律性叠加和动态比较

　　PCR，RFLP

　　基因图谱，分子量和总量判读，基因配对，聚类和百分相似比分析

　　PCR和RFLP：总量及分子量判读

　　单基因或蛋白与其它的百分相似比，基因指纹图谱，也可聚类分析