检测认证人脉交流通讯录
- 样品制备：
牛奶不需要处理；肉、鱼、虾等需均质、提取、离心、稀释。
标本的稀释原则：
首先通过文献检索的方式了解待测样本的大致含量，确定适当的稀释倍数。只有稀释至标准曲线的范围内，检测的结果才是准确的。稀释的过程中，应做好详细的记录。最后计算浓度时，稀释了“N”倍，标本的浓度应再乘以“N”。
标准品的稀释原则：2瓶，每瓶浓度为500 ng/ml，以样品稀释液做系列倍比稀释，分别稀释500 ng/ml，250 ng/ml， 125 ng/ml，62.5 ng/ml，31.2 ng/ml，15.6 ng/ml，7.8 ng/ml。样品稀释液直接作为标准浓度0 ng/ml。
辣根过氧化物酶标记环丙沙星结合物的稀释原则：
临用前以辣根过氧化物酶标记环丙沙星结合物稀释液稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制（每孔50ul），实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10ul辣根过氧化物酶标记环丙沙星结合物加990ul辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。
操作步骤
实验开始前，请提前配置好所有试剂，试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。每次检测都应该做标准曲线。如样品浓度过高时，用样品稀释液进行稀释，以使样品符合试剂盒的检测范围。
1. 加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100ul，余孔分别加标准品或待测样品100ul，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，然后在所有孔中加入50 ul辣根过氧化物酶标记环丙沙星结合物工作液。尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。酶标板加上盖或覆膜，37℃反应30分钟-1小时。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 温育后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350ul/每孔，甩干。
3. 依序每孔加底物溶液90ul，37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度蓝色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。
4. 依序每孔加终止溶液50ul，终止反应（此时蓝色立转黄色）。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。
5. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。 在加终止液后15分钟以内进行检测。
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