检测认证人脉交流通讯录
- 上海卓康以质量为本，树立“卓康质量”是公司的发展目标。我们一直加倍努力，竭尽全力做到不辜负您的支持与信赖。同时公司也离不开广大客户的帮助支持，真诚邀请国内外有实力的实验室、生物技术公司合作，共同发展。
目前卓康提供的服务范围包括：生物合成siRNA、shRNA的制备；转录编码shRNA的DNAs、转录编码shRNA的质粒载体订购；siRNA靶位的设计和实验选择分析；siRNA相关试剂和RNA技术相关产品的代理销售；重组病毒构建包装；基因蛋白表达、载体构建、多克隆抗体和单克隆抗体制备；多种细胞学服务；常用的分子生物学试剂、实验仪器、实验耗材销售等。
卓康在分子生物学和免疫学实验技术，特别抗体制备技术方面同样具有丰富经验，提供快速、优质、性价比高的实验服务。
代做实验――MTT实验服务
技术原理：
MTT比色法以活细胞代谢物还原剂3-(4,5-二甲基噻唑-2) –2，5-二苯基四氮唑嗅盐，商品名为噻唑蓝，简称MTT 。检测原理为活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性的MTT还原成为难溶性的蓝紫色结晶物甲臢（formazan）并沉积在细胞中，而死去的细胞无此功能。二甲基亚砜（DMSO）能溶解细胞中的甲臢，利用酶联免疫检测仪测定490 nm波长处的光密度OD值，可以间接反映出活细胞数量。在一定范围内，MTT结晶物形成的量与细胞数成正比。该方法已经广泛用于一些生物活性因子的活性检测，大规模的抗肿瘤药物筛选，细胞毒性试验以及肿瘤放射敏感性测定等。
服务内容:
我们多用与转染目的载体后MTT检测细胞增值：通用设置时间点12h，24h，36h，48h，72h（时间点也可由客户定）
组别设置：正常组，HK阴性对照组（主要是用来消除转染试剂毒性的影响），目的载体组
实验步骤：
1：接种细胞：接种细胞:用0.25%胰酶消化单层培养细胞,用完全培养液配成单层培养细胞悬液，以每孔103-104个细胞接种于96孔板中，每孔200vl；37度Co2箱陪养24h。
2:培养细胞：转染目的载体后同一般培养条件，培养3－5天（可根据试验目的和要求决定培养时间）。
3：呈色：培养3－5天后，每孔加MTT溶液（5mg/ml用PBS <ph=7.4>配）20ul.
继续孵育4小时，终止培养，小心吸弃孔内培养上清液，对于悬浮细胞需要离心后再吸弃孔内培养上清液。每孔加150ul DMSO，振荡10分钟，使结晶物充分融解。
4：比色：选择490nm波长，在酶联免疫监测仪上测定各孔光吸收值，记录结果，以时间为横坐标，吸光值为纵坐标绘制细胞生长曲线。
注意事项：
（1）选择适当的细胞接种浓度。
（2）避免血清干扰：一般选小于10％的胎牛血清的培养液进行试验。在呈色后尽量吸尽孔内残余培养液。
（3）设空白对照：与试验平行不加细胞只加培养液的空白对照。其他试验步骤保持一致，最后比色以空白调零。
服务承诺:
1． 提供每组平均OD值详细记录
2． 由OD值绘制生长曲线及结果分析
服务价格：
具体价格根据客户实验而定
联系电话：021－55660344，021－55063976
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