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上海卓康生物科技有限公司

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代做实验――细胞转染服务

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  • 代做实验
    • 上海卓康以质量为本,树立“卓康质量”是公司的发展目标。我们一直加倍努力,竭尽全力做到不辜负您的支持与信赖。同时公司也离不开广大客户的帮助支持,真诚邀请国内外有实力的实验室、生物技术公司合作,共同发展。 目前卓康提供的服务范围包括:生物合成siRNA、shRNA的制备;转录编码shRNA的DNAs、转录编码shRNA的质粒载体订购;siRNA靶位的设计和实验选择分析;siRNA相关试剂和RNA技术相关产品的代理销售;重组病毒构建包装;基因蛋白表达、载体构建、多克隆抗体和单克隆抗体制备;多种细胞学服务;常用的分子生物学试剂、实验仪器、实验耗材销售等。 卓康在分子生物学和免疫学实验技术,特别抗体制备技术方面同样具有丰富经验,提供快速、优质、性价比高的实验服务。 代做实验――细胞转染服务 技术简介: 质脂体转染 质脂体为人工膜泡,可作为体内,体外物质转送载体。将需转移的DNA或RNA包裹于质脂体,由于质脂体具有磷脂双层与胞膜相似,因此,可与细胞膜融合,将DNA转入宿主细胞。 影响转染效率差异的主要原因是细胞系间个体的差异,有的细胞系细胞膜通透性较好,质脂体复合物较容易进入细胞,转染效率就高。又有的细胞系本生就不容易被转染。其次脂类与DNA形成易于转染结构的特性存在负面效应。其中主要的问题是毒性,表现为细胞聚集在一起,从壁上脱落。另为脂质体转染易于受到血清中的脂肪与脂蛋白以及细胞外基质中带店成分,如硫酸软骨素等干扰引起细胞死亡从而影响转染效率。 电穿孔转染 核酸不能自动进入细胞,需要协助才能穿过细胞壁的物理屏障进入能够进行表达和/或复制的胞内位点。电流能够可逆地击穿细胞膜形成瞬时的水通路或膜上小孔促使DNA分子进入胞内,这种方法就是电穿孔。电穿孔的主要应用优势是适用的细胞范围广,不论真核细胞还是原核细胞都能被有效转染。当遇到某些脂质体转染效率很低和几乎无法转入时建议用电穿孔法转染。 一般情况下,高电场强度会杀死50%-70%的细胞。这种致命的后果根据细胞系的不同而异,与加热或电解无关,也与当时施加的能量与密度无关。相反,细胞死亡与电场强度与整体作用时间相关。我们公司针对细胞死亡开发出了一种电转保护剂,大大的降低了细胞的死亡率,同时也提高了电穿孔转染效率。 腺病毒感染 对于质脂体转染与电穿孔转染都无法成功转染的细胞系建议用腺病毒感染 此法可以快速100%感染率,检测成功率高。 服务内容: 1. 转染目的载体确认细胞转染效率 2. 转染目的载体后进行相关检测实验 客户须知: 1.一般情况下细胞的转染效率达到50%,我们才可以成功进行后续检测实验。如果在25%-40%,可以进行G418瞬时筛选,低于25%也可以做G418的稳定筛选,大部分情况下我们都会建议用大流式细胞仪进行筛选,此方法既快速又方便,而且可以得到100%的阳性细胞,一般经过大流式筛选的细胞做后续基因水平或蛋白水平检测都可以得到理想的结果。 2.客户需提供高效率毒性低的转染试剂(质脂体)或购买我们公司代理的德国Biontex公司脂质体转染试剂(此试剂转染效率中上等优点是毒性低) 3.如客户提供细胞系转染效率达到50%,我们可以顺利快速进行实验,约1-2个工作日就可完成此实验。如客户提供细胞系转染效率低于50%,我们就要进行1-2个工作日的 G418的筛选实验,转染效率低于25%,无论做G418的稳定筛选还是大流式筛选实验时间都将推后2-3个工作日。 服务价格: 具体价格根据客户实验而定 联系电话:021-55660344,021-55063976 传真:021-55063976 网址:www.elisabio.com 网址:www.antibodybio.com 联系人:黄力,业务qq: 909447355 公司对外邮箱:sales@elisabio.com

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