检测认证人脉交流通讯录
- 无血清冻存液冻存步骤：
1. 常规方法收集对数期的贴壁细胞或悬浮细胞于试管中；
2. 确认所需冻存的细胞数量；
3. 将所需冻存细胞收集于离心管中，1000rpm，5min 离心，收集细胞沉淀，并弃掉上清液；
4. 加入适量的无血清细胞冻存液于离心管中，加入量按照细胞保存浓度为 5X105 至 1X107/ml 密度，轻柔的混匀细胞，获取细胞混合液；
5. 将获取的细胞混合液按照 1~1.5ml/管，分装于冻存管中；
6. 将冻存管直接放入-80℃保存，可长期保存。
无血清冻存液细胞复苏步骤：
1. 从-80℃取出冻存细胞，立即放入 37℃水浴锅快速解冻；
2. 待细胞混合液彻底解冻融化后，立即加入 1ml 细胞培养基，混合；
3. 将混合液移至含有约5ml该细胞培养基的离心管中，1000rpm，5min离心，弃掉上清，获取细胞沉淀；
4. 加入适量的新鲜细胞培养基，轻柔混匀，并将混合液转移至培养容器，观察细胞状态正常后，进行后续细胞培养工作。
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