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PEG1500溶液(50%,无菌) 说明书

  • 这真不是您需要的产品?
  • 品  牌:
  • 远慕
  • 主要规格:
  • 10ml 5×10ml
  • 用  途:
  • 聚乙二醇可用作融合剂,以获得生产单克隆抗体的杂交瘤细胞,诱导细胞杂交,同sigma10783641001。
    • 上海远慕生化试剂厂家提供PEG1500溶液(50%,无菌) 说明书,详细介绍PEG1500溶液(50%,无菌) 的信息说明,操作步骤,注意事项及其他咨讯,本司是家老牌生化试剂供应商,现货为客户供应不同的生化试剂,有机试剂,无机试剂,化学试剂,通用试剂及其他系列,如有需要,欢迎订购!

      PEG1500溶液(50%,无菌) 说明书

       

      【信息说明】

      产品名称:PEG1500溶液(50%,无菌)

      供应商:远慕生化试剂厂家

      规格:10ml 5×10ml

      分类:细胞培养

      储存条件:4℃,6个月

      用途:聚乙二醇可用作融合剂,以获得生产单克隆抗体的杂交瘤细胞,诱导细胞杂交,同sigma10783641001。

      注意事项:无菌溶液,由HEPES和PEG1500或称聚乙烯醇1500组成,经过滤除菌。

       

      【操作步骤】

      1、如果变成胶冻状,可37~60℃水浴使其变成溶液。

      2、单层贴壁细胞:将杂交前体细胞以相同数量(5×104/ml)接种,以适当的培养基培养细胞,待细胞贴壁扩展至汇合成片(80%汇合率)的密度。

      3、吸干培养液,加入PEG1500溶液(50%,无菌),轻轻转动1min使PEG1500溶液覆盖所有细胞。

      4、静置1min,加入5ml完全MEM培养液以稀释PEG1500溶液,弃上清液,用补加1×HT和1×A的完全培养液重新悬浮细胞。

      5、融合12~24h后进行异核体分析,杂交前体细胞在4~5天内发生死亡,对于大多数融合前体细胞而言,10~14天可见杂交细胞克隆。

      6、悬浮细胞:将两种不同亲体的细胞各1ml(约为1×107)混匀,离心以沉淀杂交前体细胞,弃上清液,使之剩余约1ml,手指轻弹管底或手摇离心管使两种细胞混匀并重新悬浮。

      7、1000g离心,弃上清液,加入完全MEM培养液以稀释PEG1500溶液,吸干净稀释的PEG1500溶液;用无血清MEM培养液,手摇离心管重悬细胞(不要破坏细胞),1000g离心5min,弃上清液,重复1次该步骤。

      8、加入含有20%的胎牛血清的HAT选择培养液,混匀,将细胞悬液用培养液稀释至5×104/ml,接种于96孔板(每孔0.1ml)或其他器皿中,37℃5%CO2孵育过夜后选出融合细胞。


      【注意事项】

      1、应注意无菌操作,避免被微生物污染。

      2、PEG1500溶液较为粘稠时,可37~60℃水浴使其变成溶液。

      3、体外培养的单层贴壁细胞或悬浮细胞均可做融合,但成功概率较大的是单层贴壁细胞。

      4、如需HAT选择系列产品,可选择LeageneAMediaSupplement(50×)、HTMediaSupplement(50×)、HATMediaSupplement(50×)。

      5、请严格按照PEG1500溶液(50%,无菌)说明书上的要求进行规范化操作。

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