药学院中心实验室

负责人：左秋红  电话：39943495

主要规格及技术指标

　　Biologic DuoFlow双流速中高压蛋白层析系统是Bio- Rad公司针对蛋白分析纯化工作的复杂性和灵活性要求而设计制造的。仪器采用完全的模块化设计，两种精密的层析泵、多种检测器、多种控制阀系统，可以根据用户的需要和经费情况随意配置，并根据研究工作的扩展不断升级。系统各部件的设计都高度集成，安装十分紧凑，节省安置面积并减少样品扩散提高性能，在处理敏感样品时整个系统可放入层析柜在低温操作。

　　动力系统采用双柱塞双元梯度泵，独特的泵头更换技术，确保在大范围流速调整时的高精度、高稳定性和长寿命。泵头装配换用灵活方便，双活塞设计，输液十分平稳。整个输液系统具有100%的生物兼容性。F10泵头提供10ml/min流速、3500psi(233bar,23MPa)压力用于分析和实验室规模制备，F40泵头提供40ml/min流速、1000psi(66bar,6.6MPa)压力满足绝大部分实验室制备需要，升级Maximizer后在压力不变情况下流速分别可达20 ml/min流速、80ml/min流速、并且可以实现pH在线混合等功能。

主要功能及特色

　　蛋白质分离纯化的重要问题是如何在纯化过程中保持温和的条件，从而保证在此过程中蛋白质的结构和活性不受影响。层析技术(Chromatography)为蛋白质纯化提供了这样的条件，大都在室温或低温下操作，所用的流动相可以是与生理液相似的具有一定pH值、离子强度的缓冲水溶液，所用的填料表面修饰各种基团，可与蛋白质分子温和接触，从而保持了蛋白质分子的原有构象和生物活性。层析系统以及各种分离纯化所需的填料和层析柱是保证该纯化过程的稳定性、重现性和自动化进行所必需的设备。

样本检测注意事项

　　1、所有用于层析系统的缓冲液和样品均要用0.45um的滤膜过滤并脱气。

　　2、开机前检查仪器连接状态，并用缓冲液充满泵进水管道，可用针筒在泵前下方的Priming口进行抽吸。

　　3、关机时层析柱按照其使用说明进行操作保护，仪器如果仅放置过夜或1-3天内继续使用，仪器管道用低盐溶液冲洗即可；如果仪器超过1星期停用，在系统管道必须充满20%乙醇，可配20%乙醇用泵(A、B各50%)冲洗系统，其中层析柱街头处用白色街头短接，进样阀用20%乙醇充满。

　　4、如果使用了高浓度盐溶液(超过1M)，则使用后必须用清水擦拭各接头，桌面保持干净整洁。

设备使用相关说明

　　1.柱子使用完毕后应按柱子使用说明书有关程序彻底清洗或再生，并用合适的缓冲液保存，防止长菌和干涸。

　　2.仪器使用完毕后如果放置过夜，应用低盐缓冲液(最好是去离子水)彻底清洗所有管道和阀门，包括缓冲液选择阀、Maximizer的4个比例阀、上样阀、收集换向阀等的各个位置，防止盐析出堵塞管道、损坏泵头和阀门。仪器不可以在管道内是高盐缓冲液时放置过夜，高温天气尤其要注意。

　　3.如果仪器一段时间不用，用去离子水清洗后(特别注意上样阀Load、inject、purge沾染高浓度蛋白易长菌位置的清洗)，再用20%乙醇或0.05%叠氮化钠溶液充满管道，长期不用要把泵、阀门、检测器等出入口用随机带的塞子(fittings)封闭以免溶液挥发。防止仪器管道阀门内部长菌或微生物，高温天气尤其要注意。长菌或微生物后很难除去。

　　4.仪器存放应置干燥通风环境，防止仪器长霉菌或锈蚀。如果仪器放在低温环境(冷室或层析柜)，不要关闭电源，防止水蒸气凝结。