广州微平科技服务有限公司

预约须知

1，样品量需要提供粉末20mg以上，液体5-10ml；

2，送样前需要自行确认好样品在指定流动相中的溶解性，难溶样品最好自行溶好再送样, 溶解后的样品要透明均一，过滤头不堵；

3，样品溶好之后，有机相样品需要过0.45 μm滤膜，水相样品需要过0.22 μm滤膜，样品浓度一般控制在2-5mg/mL；

4，如果对测试有特殊要求，请联系相关负责老师或拨打客服热线。

400-831-0631400-831-0631

 

GPC

型号：岛津 CTO-20A  Waters 1515

 

测试项目：

a. 常温流动相: 水相、THF、DMF、DMSO、三氯甲烷、六氟异丙醇、a-氯奈；

b. 高温流动相：DMF（80℃），三氯苯；

c. 可以测相对分子量的流动相：水相、THF、DMF、DMSO、三氯甲烷、六氟异丙醇、a-氯奈、三氯苯

d .可以测绝对分子量的流动相：水相、THF、DMF、三氯苯

更多测试要求请咨询客户经理或者拨打全国客服电话;

样品要求：

1. 样品状态：可为液体、粉末、块状样品;

2.样品要求在指定流动相中有较好的溶解性，样品量要求10mg左右。

3.如果样品溶解性较差，要求提前溶解好（浓度要求在2-5mg /ml左右），或者提供合理溶解方法（如果方法太复杂，费用问题需要提前咨询客户经理）

 

常见问题及回答：

为什么样品要求在指定流动相中溶解性要好？

因为GPC（凝胶渗透色谱）本质上是一个色谱测试，是通过色谱柱分离不同分子量的成分，溶解性不好的话是需要过滤后测试的，不溶成分的分子量就无法测试，而且如果样品溶解度差的话，样品有可能会在色谱柱析出，毁坏柱子。

 

为什么测试结果跟预期分子量差别较大？

第一，gpc的测试原理是每种流动相都有对应的一种标准物质作出的标准曲线，样品测试结果要跟标曲比较，然后得出测试结果，所以大多数流动相得到的结果是样品的相对分子量，如果样品跟标准品差别太大的话，测试结果就有可能跟真实值相差较大；第二，GPC一般测试样品都是聚合物，预期分子量只是基于实验设计的一个预期值，所以有时候跟实际情况有出入也是正常的。

 

相对分子量和绝对分子量的区别？

第一，测试原理不同：相对分子量时通过建立标准物质的标准曲线，待测样品与之相比得到分子量分布；绝对分子量是通过三联检测器，主要是激光检测器在样品颗粒表面散射角度不同通过数学模型计算分子量分布；第二，检测器不同：相对分子量主要是折光示差检测器，绝对分子量需要示差，浓度，激光三联检测器；第三，检测分子量范围不同：相对分子量可以检测较小分子量，而一般分子量在几万以上才适合绝对分子量

 

结果展示及说明：

测试结果给出的是PDF格式和excel格式数据，下边分别是DMF相对分子量和水相GPC绝对分子量示例。

 

服务简介

凝胶渗透色谱是一种液相色谱，原理是利用高分子溶液通过一根装填有凝胶的柱子，在柱中按分子大小进行分离。

柱子为玻璃柱或金属柱，內填装有交联度很高的球形凝胶，球形凝胶本身有很多按一定分布的大小不同的孔洞，根据大小分子不同的行程可以把混在一起的高聚物分子逐级分离开来，先分离出来的是大分子，较小的聚合物分子受到溶剂分子的排斥也随后分离出来，然后再用一定的方法检知每级中溶质的浓度和分子量。

凝胶色谱（GPC）可测定高分子聚合物（含烯烃类高聚物）、低聚物、糖类、蛋白质等的平均分子量，分子量分布，分子量分布宽度，分析共聚物中均聚物及杂质。

 

检测项目

THF,氯仿相要求分子量500-150万 ，DMF流动相要求分子量大于2000-150万，绝对分子量测试要求分子量大于3000.（数均分子量小于500的测不准，数据处理会存在误差）

绝对分子量目前仅支持 四氢呋喃、氯仿相

 

样品要求

1. 样品必须可以充分溶解于所选流动相；

2. 固体样品量要求至少10mg；请事先尝试溶解样品，浓度范围：2-3mg/ml

3. 液体样品量不少于2mL，浓度最好大于5mg/mL, 具体浓度请告知

 

常见问题及解答

样品可以部分溶解，取上清液可否进行测试？

不可以，因为溶解性不好的话不溶成分的分子量就无法测试，而且如果样品溶解度差的话，样品有可能会在色谱柱析出，毁坏柱子。

水相GPC如何看图说明：

每个样品有2个测试报告: 原始数据和PDF测试报告。

测试数据一般看Mw(重均分子量)、Mn(数均分子量)、Mp(最高峰的分子量)、Mz/Mz+1(更高的平均分子量)、峰面积，多分散性等几个比较重要的数据，客户可根据自己需要参看测试报告。

举例说明：

 

 

小于1000分子量，或者大于100万分子量的出峰区域不能积分出Mw等数据，如果确实需要再反馈，可以利用数据校正，模拟计算出相应的数据。

GPC软件每次只能积分一个出峰面积，故存在多分布谱图，多次积分截图给Mw等数据。

论文中怎么写GPC测试方法（详细版本，根据需要酌情精简）

凝胶渗透色谱（GPC）分析（以水相为例）

①待测样品制备

取样 0.30 g 加入5 mL 样品瓶中，并加入含 0.1 mol/L硝酸钠的超纯水至刻度线，超声分散后待测。

②GPC 分析测试条件

泵：Waters 1515 Isocratic HPLC Pump；

色谱柱：ULTRAHYDROGEL 120 PKGD，ULTRAHYDROGEL 250 PKGD，ULTRAHYDROGEL 500 PKGD；

检测器：Waters 2414 Refractive Index Detector；

流动相：含有 0.1 mol/L 硝酸钠的超纯水；

流量：1 mL/min；

样品浓度：25~35 mg/mL；

标准样品为Polymer Standards Service-USA Inc.提供的窄分布聚乙二醇，分子量分别为Mp=330000、176000、82500、44000、25300、20600、12600、7130、4290、1400、633、430。

描述聚合物分子量的Mw，Mw和Mz有什么不同？

我们在研究聚合物的链长和分子量分布时，常常遇到这样的困惑，表征一个聚合物分子量往往涉及到下列参数：数均分子量Mn，重均分子量Mw，更高的平均分子量Mz以及粘均分子量 Mv。这些参数究竟有什么不同呢？不急，且听我慢慢分解

 

聚合物是由重复单元（单体）通过化学键合形成的长链。如需了解聚合物的物理性质（如机械强度、溶解性和脆性），就需要首先了解聚合物链长度方面的相关知识。链长通常以聚合物链的分子量表示，与单体的相对分子量和链中单体的数目相关。然而，所有的合成聚合物都具有多分散性，包含有长度不等的聚合链，所以聚合物的分子量不是一个单一值，而是一个聚合物链长和分子量的分布范围。因此聚合物的分子量必须通过计算样品中所有聚合物链分子量的平均值来描述。

 

数均分子量Mn

数均分子量是样品中所有聚合链分子量的统计平均值，其定义如下其中Mi代表单链分子量，Ni代表具有相应分子量的链数目。Mn可以通过聚合机制来进行预测，并通过测定给定质量样品中的分子数量来确定；例如端基分析等依数性方法。如果用Mn来表征分子量分布，则Mn两侧分布有同等数量的分子。

 

重均分子量Mw

重均分子量如下定义相对于Mn，Mw测定平均分子量时把单链分子量大小对Mw的贡献也考虑进去。链的质量越大，对Mw的贡献也越大。通过灵敏地测定分子大小，而不只是测定其数量的方法来确定Mw，如运用光散射技术。如果用Mw表征分子量分布，则Mw两侧分布有同等重量的分子。

 

更高的平均分子量Mz, Mz+1

通常，一系列的平均分子量可以由下面的方程定义

当n=1时，M=Mw
n=2时，M=Mz
n=3时，M=Mz+1

更高的平均分子量更多地依赖于高分子量的组分，因此也就更难以进行精确测定。通常需要使用诸如扩散和沉降等技术测量聚合物分子的行为来进行测定。虽然Z均分子量不常用于表征聚合物，但还是有几种重要的方法能够通过测定链长获得Z均分子量。

针对所有合成的多分散性聚合物

Mn<Mw<Mz<Mz+1

 

多分散性指数

用于衡量聚合物分子量分布的广度，其定义如下Mw/Mn多分散性指数越大，分子量分布越广。所有链长都相等的单分散聚合物（如蛋白质），其Mw/Mn=1。经过最佳控制合成的合成聚合物（用于校正的窄分子量分布聚合物），其Mw/Mn值应在1.02到1.10。逐步聚合反应生成高聚物的Mw/Mn值通常在2.0左右，而连锁聚合反应产物的Mw/Mn值在1.5到20之间。

 

粘均分子量 Mv

用粘度法测得的聚合物的分子量。在所有的聚合物分子量的测定方法中，粘度法尽管是一种相对的方法，但因它仪器设备简单，操作便利，分子量适用范围大，又有相当好的实验精确度，所以成为人们最常用的实验技术。

 

GPC/SEC测定的平均分子量和Mp

SEC是唯一一种在测定聚合物整体分布时，能同时测定Mn、Mw、Mz和Mz+1的技术。SEC也可以对另一种平均分子量Mp进行计算，峰分子量Mp定义如下

Mp=最高峰的分子量

因此，Mp也是分子量分布的一种表达方式。Mp用于表征分子量分布极窄的聚合物，如校准聚合物标准品。